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熒光單標(biāo)是利用抗原抗體特異性結(jié)合原理,在一張切片上的抗原進行熒光標(biāo)記的方法。
實驗流程:
石蠟切片脫蠟至水
抗原修復(fù)
封閉
一抗4℃過夜孵育
熒光二抗室溫孵育
DAPI染核
封片-鏡檢.
DAPI紫外激發(fā)波長330-380nm,發(fā)射波長420nm,發(fā)藍光
FITC紫外激發(fā)波長465-495nm, 發(fā)射波長515-555nm,發(fā)綠光
CY3紫外激發(fā)波長510-560, 發(fā)射波長590nm,發(fā)紅光.
CY5紫外激發(fā)波長 608-648nm, 發(fā)射波長672-712,發(fā)橙光
結(jié)果;
細胞核呈藍色,陽性呈紅色/綠色/橙色。
熒光單標(biāo)是利用抗原抗體特異性結(jié)合原理,在一張切片上的抗原進行熒光標(biāo)記的方法。
實驗流程:
石蠟切片脫蠟至水
抗原修復(fù)
封閉
一抗4℃過夜孵育
熒光二抗室溫孵育
DAPI染核
封片-鏡檢.
DAPI紫外激發(fā)波長330-380nm,發(fā)射波長420nm,發(fā)藍光
FITC紫外激發(fā)波長465-495nm, 發(fā)射波長515-555nm,發(fā)綠光
CY3紫外激發(fā)波長510-560, 發(fā)射波長590nm,發(fā)紅光.
CY5紫外激發(fā)波長 608-648nm, 發(fā)射波長672-712,發(fā)橙光
結(jié)果;
細胞核呈藍色,陽性呈紅色/綠色/橙色。