免疫組化雙標(biāo)是通過不同的顯色劑，使兩個(gè)抗體在一張片子上顯色的方法，同免疫熒光雙標(biāo)。

 實(shí)驗(yàn)步驟

1. 石蠟切片脫蠟，入水

2. 免疫雙標(biāo)染色

3. 蘇木素染細(xì)胞核

4. 封片，鏡檢

實(shí)驗(yàn)結(jié)果

陽性呈棕色，陽性呈紅色，細(xì)胞核成藍(lán)色。

注意：

1、不同種屬來源的抗體雙標(biāo)，兩種抗體間交叉反應(yīng)少，特異性較高，即使細(xì)胞內(nèi)抗原量很少也能檢測(cè)。

2、抗原定位需要是不同類型細(xì)胞的相同或不同部位，或是同一類型細(xì)胞的膜+漿、膜+核或漿+核。定位相同細(xì)胞的相同或不同部位，顯示顏色不同，對(duì)比度不明顯，結(jié)果不清晰(可以做熒光雙標(biāo))。

3、進(jìn)行雙標(biāo)實(shí)驗(yàn)之前，需要對(duì)每種一抗分別進(jìn)行單獨(dú)染色預(yù)實(shí)驗(yàn)，摸索實(shí)驗(yàn)條件，實(shí)驗(yàn)結(jié)果達(dá)到預(yù)期后再進(jìn)行雙標(biāo)實(shí)驗(yàn)，且前后實(shí)驗(yàn)條件相同。另外要注意的是兩個(gè)抗原的修復(fù)方法應(yīng)該一致或確定一個(gè)抗體的修復(fù)對(duì)另一個(gè)抗體的染色結(jié)果沒有影響。